近日，我室王建华研究组在国际学术期刊Journal of Virology在线发表了题为HIV-1 Nef activates proviral DNA transcription via recruiting Src kinase to phosphorylate host protein Nef-associated factor 1 to compromise its viral restrictive function的研究论文。该研究揭示Nef蛋白激活潜伏HIV的新功能。机制上，HIV Nef蛋白通过招募Src酪氨酸激酶磷酸化宿主蛋白Naf1,逆转Naf1对HIV的抑制作用，通过激活PI3K/AKT/mTORC1细胞信号通路，进而激活HIV前病毒DNA的转录和激活潜伏的HIV。
HIV编码的Nef蛋白（Negative Factor，负调控因子）可下调免疫细胞CD4和MHC等分子抑制机体免疫，并可增强病毒复制和传播等，是一个重要的病毒致病因子。但Nef蛋白是否可调控潜伏HIV再激活未见过多报道。Naf1(Nef-associated factor 1) 是可与HIV Nef相互作用的宿主蛋白，可被包入到HIV病毒粒子中。 Naf1可调控多种细胞信号通路包括可抑制NF-κB 细胞信号。Naf1对HIV感染显示了多重调控作用。王建华研究组前期发现Naf1是可在细胞核/质间穿梭的宿主因子（2016, J. Bio. Chem）。细胞核和细胞质中定位的Naf1在调控HIV复制方面具有截然不同的功能。细胞核内定位的Naf1与另外一个宿主因子CRM1（Chromosome region maintenance 1）协作，促进HIV未剪切gag mRNA的出核，促进HIV Gag蛋白的产生（2016, J. Bio. Chem）；而细胞质内定位的Naf1通过抑制NF-κB 信号通路的激活，阻断HIV-LTR（Long terminal repeat）启动子驱动的病毒转录，维持病毒的潜伏（2017，J. Virol.）。最近，王建华研究组发现HIV Gp120蛋白刺激可诱导Naf1在髓系细胞（树突状细胞和CD14+单核细胞）中的表达，抑制HIV复制，特别是可消弱树突状细胞免疫刺激能力从而利于逃避免疫（2025，Virol Sin）。
Naf1作为HIV Nef相互作用蛋白，其与Nef相互作用如何调控HIV复制尚不清楚。本论文发现，Nef蛋白可激活潜伏HIV，揭示了Nef调控HIV复制的新功能。特别发现，Nef激活潜伏HIV的功能需要Naf1这一HIV抑制因子的存在。通过深入分析这一看似“矛盾”的因素，发现Nef可通过招募Src酪氨酸激酶导致Naf1 552位点酪氨酸的磷酸化；而Naf1-Y552位点的磷酸化则可使Naf1的“抑制”作用转换为“激活”功能。机制上，磷酸化的Naf1通过激活PI3K/AKT/mTORC1细胞信号通路，进而激活HIV前病毒DNA的转录和激活潜伏的HIV。该研究揭示了病毒蛋白与宿主蛋白相互作用调控HIV复制的新模式，并为抗病毒治疗提供潜在的治疗靶点。
本文第一作者是樊天娇博士（国家传染病医学中心，上海感染与免疫科技创新中心）和谢承作博士研究生（广州国家实验室，广州医科大学）。通讯作者是王建华教授（河南师范大学抗病毒性传染病创新药物全国重点实验室；中科院广州生物医药与健康研究院）。该研究得到来自国家基金委、广东自然科学基金和呼吸疾病全国重点实验室等项目的资助。
模式图： Nef通过招募Src激酶磷酸化Naf1促进HIV前病毒DNA转录。细胞内和病毒粒子释放的Naf1抑制PI3K/AKT/mTORC1通路。然而，HIV Nef招募Src激酶导致Naf1 552位点酪氨酸的磷酸化，使Naf1的“抑制”作用转换为“激活”功能。磷酸化的Naf1通过激活PI3K/AKT/mTORC1细胞信号通路，将转录因子P-TEFb（CDK9和Cyclin T1的复合物）募集到LTR区域以驱动前病毒DNA转录。